[求救] 磷酸化蛋白

看板Biotech作者 (find)時間14年前 (2011/09/09 18:41), 編輯推噓6(6推 0噓 8→)
留言14則, 8人參與, 最新討論串1/5 (看更多)
不好意思... 想請教一個小小的問題 由於目前的實驗是以藥物測試蛋白質的改變 但WB結果顯示target蛋白質並無減少或增多的情況， 於是想要去探討有沒有可能會是影響到target protein磷酸化， 但因為手邊沒有target protein 磷酸化抗體可以用來測試這個問題， 因此想要請教大家: 檢測這類的問題(磷酸化蛋白)是不是只能靠抗體才能解決了。 謝謝~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.70.139
推
09/09 23:36, , 1F
point mutation 可以先試試，就不需要一開始打抗體...
09/09 23:36, 1F
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09/10 16:13, , 2F
R大 謝謝您.想請教您指的protein mutation?
09/10 16:13, 2F
推
09/10 17:57, , 3F
是point mutation...不是protein...
09/10 17:57, 3F
推
09/10 23:14, , 4F
用p32不能解決嗎
09/10 23:14, 4F
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09/10 23:26, , 5F
1樓的是探討磷酸化位置的功能,完全無法探討藥物造成的變化
09/10 23:26, 5F
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09/10 23:32, , 6F
4樓的方法需要in vivo labeling及IP-WB,前述很麻煩
09/10 23:32, 6F
推
09/11 00:05, , 7F
不過沒有磷酸化抗體我也只能想到這樣了 樓上有更好的辦法?
09/11 00:05, 7F
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09/11 00:16, , 8F
自己生產磷酸化的抗體~(誤)
09/11 00:16, 8F
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09/11 00:18, , 9F
原po的重點是drug,用unknown drug測試unknown phospho是鬼
09/11 00:18, 9F
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09/11 00:20, , 10F
打牆,所以應該只是還沒買p-Ab,而不是沒有p-Ab可買吧
09/11 00:20, 10F
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09/11 00:26, , 11F
繞遠路的方法是看paper瞭解蛋白質磷酸化的下游變化有無顯現
09/11 00:26, 11F
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09/11 00:29, , 12F
畢竟如果下游訊號或生理變化沒差異,磷酸化有改變也是無趣
09/11 00:29, 12F
推
09/11 16:32, , 13F
這時候就需要人脈了 想辦法跟人借一點抗體XD
09/11 16:32, 13F
推
09/12 10:56, , 14F
打mass看分子量或許也是個方法
09/12 10:56, 14F
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文章代碼(AID): #1EQUri3S (Biotech)
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