Re: [求救] Baculovirus蛋白表現
假設clone有作成功......
讓我想到需要調整的是
表現條件(病毒感染量,表現時間點......)的優化?
※ 引述《josephkokomo (...)》之銘言:
: ※ 引述《mysterywind (mysterywind)》之銘言:
: : 發問時請注意,若是要問實驗相關的問題,請將實驗的步驟、所用的條件大致列出
: : 以方便板友幫您追蹤問題
: : ----請將上列注意事項以 ctrl + k 刪除後開始編輯文章----
: : 請問有人做過Baculovirus的蛋白表現嗎?
: : 我一直無法表現我的目標蛋白
: : 確定有轉染成功 也有抽病毒DNA
: : 但是 跑SDS WB就是沒東西?
: 你是指用Baculovirus system表達你要的蛋白嗎
: 另外假設是cytosolic protein
: 1. Cre那步驟之後 你有確定你的DNA被insert成功嗎
: 2. virus 有測過 titer嗎 或是你確定加入virus有成功感染你的cell (可以從生長曲線推測)
: 3. virus infection 之後 等多久作SDS-PAGE
: Invitrogen(life)的使用手冊有完善的教學
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