Re: [求救] 蛋白質誘導不出來!!!
不好意思，我說得有點不清不楚
PET system 是一個很棒的蛋白表達系統，只是 BL21(DE3) 讓我不爽而已。
若是可能的話，換個 Host 看看，不過前題是可以讓 PET 可以相容
可以跟廠商要 PET 的 Full Catalog (不是 plasmid only)
後面附錄的地方就有 host 資料。
我的作法您可以參考看看（host was BL21(DE3))：
假設 transformation 成功
我會準備一個 ampicillin plate 和 ampicillin broth，
挑一個 colony 在盤子上劃開，然後再到 broth 裡喇一喇
第二天，抽 plasmd，定序。若是有 in frame 表示這個 colony 是我要的
就可以從新長出來的盤子挑出來接續你要做的表達實驗並可以做短期儲存
定序剩下來的 plasmid 就可以存起來
或是把它放入 JM101 or JM109 作成 bacterial glycerol stock 放入 -80度c
這樣就有double stocks
這不是最好的方法但是對我有效，您可以參考看看。
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求救
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