[求救] 蛋白質誘導不出來!!!
各位板大好:
最近遇到了一個很頭痛的問題~又急著又無奈所以只能來這求救
我使用pET101接上的我的目標基因~用BL21(DE3)進行誘導
我的方式是pET101/BL21隔夜培養後, 隔天再取1CC加入到新的LB medium
誘導到OD=0.5~0.6 ,加入IPTG(1mM)後, 37C培養3~6小時~跑SDS-PAGE
降溫誘導,加入glucose這些條件,這個我都做過了,我的蛋白質約在14kDa
也不可能是包涵體的問題,因為我是連誘導都誘導不出來,試條件快兩個月了
是因為分子量小所以誘導不出來嗎? 換別株相同的pET101的clone也是無法誘導
,想說是不是pET101無法誘導小蛋白質~~我真的沒有辦法了~各位板大救救我好嗎?
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