Re: [問題] 凍細胞一問
※ 引述《mimosasky (浪者天涯)》之銘言:
: 我不知道不同細胞及其凍細胞的方法有否差異
: 我們實驗室主要為3T3-L1
: 以DMSO為抗凍劑
: 放入液態氮前的過程簡單多了
: 把細胞放入冷凍紙盒後
: 用多層的報紙包住就放入-80 overnight
: 第二天直接放進液態氮中
: 如此方法解凍下來的細胞存活率看也有6~70%
: 據說有人曾忘了把細胞從-80拿出來
: 結果細胞有活啦~但也不曉得是他本身凍細胞技術本身就有問題
: 細胞死亡率偏高....
那就又來說說 貧困實驗室的我
以前實驗室裡面連液態氮筒是啥都沒見過
要液態氮還得要去其他實驗室 拿著自己的小鋼杯 借點來用
所以 實驗室裡的細胞都是保存在 -80
通常我把細胞跟保存液(含有10%DMSO)
混合均勻後 很快的放在冰桶內(4度C) (我都會先準備好在操作台旁邊)
放置10分鐘 在放置在-20 約1~2小時 再轉放在-80
就這樣 因為沒有液態氮筒啦
至少細胞拿出來解凍 細胞都存活的不錯 (80%)
不過 如果有液態氮筒 當然是最好的啦
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