Re: [問題] 凍細胞一問
※ 引述《skenny (Chord7#)》之銘言:
: 一般要做細胞保存都是用冷凍細胞
: 冷凍細胞過程中是使用漸凍,
: 4→-20→-80→液態氮
: 我的問題是,似乎在冷凍細胞的時候在每種溫度下都有一定的放置時間
: 大約1-2小時左右
: 那如果在-20或者是-80的時候放超過2小時以上呢?1天?2天?
: 難道這樣細胞沒辦法保存很容易死嗎?
: 很奇怪的疑問,不知道有沒有先進能夠提醒我@@?
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: 補述:
: 盒子感覺起來是紙做的,裡面有大約90個小格
: 抗凍劑 使用10% DMSO
我不知道不同細胞及其凍細胞的方法有否差異
我們實驗室主要為3T3-L1
以DMSO為抗凍劑
放入液態氮前的過程簡單多了
把細胞放入冷凍紙盒後
用多層的報紙包住就放入-80 overnight
第二天直接放進液態氮中
如此方法解凍下來的細胞存活率看也有6~70%
據說有人曾忘了把細胞從-80拿出來
結果細胞有活啦~但也不曉得是他本身凍細胞技術本身就有問題
細胞死亡率偏高....
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