[問題] 凍細胞一問

看板Biotech作者 (Chord7#)時間16年前 (2007/12/28 17:52), 編輯推噓3(3推 0噓 7→)
留言10則, 4人參與, 最新討論串1/5 (看更多)
一般要做細胞保存都是用冷凍細胞 冷凍細胞過程中是使用漸凍， 4→-20→-80→液態氮 我的問題是，似乎在冷凍細胞的時候在每種溫度下都有一定的放置時間 大約1-2小時左右 那如果在-20或者是-80的時候放超過2小時以上呢？1天？2天？ 難道這樣細胞沒辦法保存很容易死嗎？ 很奇怪的疑問，不知道有沒有先進能夠提醒我@@? ---- 補述： 盒子感覺起來是紙做的，裡面有大約90個小格 抗凍劑 使用10% DMSO -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.129.77.1
推
12/28 18:36, , 1F
你的冷凍時間會不會太短？細胞是放在什麼的東西冷凍
12/28 18:36, 1F
→
12/28 18:37, , 2F
盒子還是保麗龍或是其他抗凍劑用的是什麼？
12/28 18:37, 2F
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12/28 18:39, , 3F
盒子還是保麗龍或是其他容器？抗凍劑用的是什麼？
12/28 18:39, 3F
※ 編輯: skenny 來自: 140.129.77.1 (12/28 18:46)
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12/28 18:46, , 4F
我不知道時間是長還是短？只是聽從指示，所以有此一問
12/28 18:46, 4F
推
12/28 19:48, , 5F
就照凍細胞盒上的說明阿...放到-80 1分鐘降1度...
12/28 19:48, 5F
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12/28 19:50, , 6F
隔天在丟到液態氮...
12/28 19:50, 6F
推
12/28 21:16, , 7F
10%DMSO+90%Serum -20度20min->-80度O/N->液態氮
12/28 21:16, 7F
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12/28 21:17, , 8F
放-80太久細胞存活率會慢慢下降
12/28 21:17, 8F
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12/28 21:18, , 9F
不過一個禮拜內都還好 解凍過放-80六個月的 存活率大
12/28 21:18, 9F
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12/28 21:18, , 10F
概40-50% 同一批放液態氮的有90%
12/28 21:18, 10F
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