Re: [問題]關於膜蛋白的萃取
我也在做膜蛋白的純化實驗
用的是古早方法....打破細胞後做超高速離心
最後離下來有點透明的就是membrane fraction了
不過有個小問題：
就是membrane fraction好像蠻難resuspense的耶
我用的lysis buffer是TBS+1% triton X-100，後來用到2%也有些溶不掉
請問版上有人做過類似實驗嗎？最後membrane fraction是用哪種東西溶掉的，感恩><
※ 引述《belady (白衣天使黑心肝)》之銘言：
: 目前我正在作這方面的實驗
: 但材料是原核生物Gram negative bacteria
: 方法是先破菌（ultrasonication, fresh pression我都做過）
: 所得的crude protein在利用 ultracentrifuge進行萃取
: 所得產物及為膜蛋白（進行SDS page後可見許多蛋白質）
: 給你參考一下 不知道你合不合用
: ※ 引述《vancent (新的鄉民XD)》之銘言：
: : homemade的話~
: : 你可以查查protein fractionation
: : 不過這只是個粗略的萃取方法
: : 你如果要很精細的話
: : 可以考慮梯度密度離心~像是用CsCl去做
: : 會比較純
: : 我也剛做完這部份的實驗xdddddddddddd
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