Re: [問題] pGEM不是應該很好接的嗎~!?

看板Biotech作者bioeric (123)時間18年前 (2007/08/25 21:42)推噓3(3推 0噓 1→)

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整個實驗中的關鍵點很多個 1.先檢查看看PCR使用的Polymerase是否不含proofreading能力最近很多價廉物美的ploymerase 都有proofreasding功能了拿錯的話 PCR product的末端A就不會加上了當然拿去與T-vector ligation會摃龜 2.insert與vector的比例但這點的影響不會大到完全沒半顆成功 3.ligase ligase是否活性有下降 enzyme這種東西放久了活性會有影響其中ligase buffer中的ATP 影響很大 ATP保存期限很有限 4.Transform的過程是否過程太激烈 E.Coli死傷慘重或是compment cell沒做好效力低分生這種東西.... 運氣佔絕大多數是用來磨練研究生的心性老闆的耐性還有....研究經費的奢侈性 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 220.129.171.213

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