Re: [問題] pGEM不是應該很好接的嗎~!?
※ 引述《chougham.bbs@ptt.cc (&&)》之銘言：
: 我是用Promega 的 pGEM-T easy Vector system
: 我要的片段在之前已經利用上面提到東西接起來了~3k vector+1k insert
: 現在要利用PCR~來換我insert兩端的切位~
: 又因為~我的template是pGEM
: 所以為了防止transform後被原來的template干擾~
: 我PCR完的產物~利用Gel-M~來做gel elution
我的經驗是經過gel elute的話,PCR product兩端的A可能會掉大部分
我建議gel elution的產物另作A-tailing
ligation只要在室溫1小時就夠了.正常來說可長100-200 colonies.
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