Re: [問題] 製作SDS-PAGE時會漏膠
※ 引述《Bluecold (黑特版比就可版好笑)》之銘言：
: 有沒有考慮用最原始的方法?
: 看了版友們的回文
: 發現大家都是用鑄膠模
: 所以都會有型號的問題產生
: 況且有些海綿啊 膠墊啊 好像過一段時間就會壞掉的樣子
: 我老闆因為覺得鑄膠模不好用
: 所以我們實驗室都用比較克難的方法
: 提供給你參考一下
: 首先把spacer跟兩片玻璃擺好 然後下面貼膠帶
: 膠帶要貼在玻璃上 貼的紮實一點
: 相同的 spacer的兩側也要貼 一樣也是貼的紮實一點
: 注意膠帶要用寬的那一種 不要用細的
: 全部貼完以後 用長尾夾夾起來
: 擺個一個小時以上 讓膠帶上面的有機溶劑揮發
: 這樣水才不會破壞膠帶的黏性
: 這樣一來應該是不會漏
: 我現在這樣做膠 load進去多少就凝固多少
: 上面用水去壓會比較快凝固
: 如果真的擔心會漏的話
: 那麼膠帶就只黏下面就好 然後用濃度低的agarose
: 大概load個300-200ul 讓agarose均勻的分布在底部
: 這樣就可以了 不過這樣一來的話
: 可能會有一些agarose滲到spacer 跟 玻璃的中間
: 造成有些well可能會滲
: 如果用卡馬西 blue染的話就沒有什麼差
: 但是要是做western的話 可能就會影響到
: 如果上述的方法都還是會漏的話
: 那麼還有幾招 我老闆教的......
: 1. 改運吧 可能是八字太輕 會做不出來
: 要不然就......
: 2. 拿著你的pipetman 用20P的就好了
: 裝滿著TEMED 看到哪裡漏就給他滴下去.....
: 老闆說這是不傳密技 請各位別聲張出去 拜託XD
: 他上個禮拜教我的 我用過一次 真是好用
我的做法...꜊
兩片玻片放入適當ㄉ封口袋
用封口機封好呈全部密封狀態
再把要放牙齒處剪開
前後在各放一片玻璃
前面一定要較短的那一片(這樣比較好插牙齒)
再用夾子把4片玻璃夾住立起來
封口袋多餘的部份可夾在玻璃內
如此做連膠台膠條都不用
就可輕鬆做膠不會漏....
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推
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