Re: [問題] 製作SDS-PAGE時會漏膠
※ 引述《GLNVA (自游自在)》之銘言:
: 喝 我們實驗室也是碰過這問題,我碩一的時候怎麼作怎麼美,到了碩二不知道怎麼了
: 趕data它拼命就給我漏,漏的挺嚴重的!我也用過paraffin,也換過新的玻璃(Bio-Rad
: 原廠的喔)都沒辦法撐很久,後來找廠商來,
我也是用 Bio-Rad 的,型號 Mini PROTEAN 3 cell (小片膠)
我覺得架子跟玻璃還有墊子應該都沒什麼問題 (那兩片灰色的墊子要一兩千XDD)
因為漏膠的那組用一樣的東西重作會 ok,而且漏膠是有時候會漏,有時候
不會,我在想是不是是膠本身的問題,前面有板友提到 load 水進去不會漏
,load 膠偏會漏 (明明膠就比水還黏稠,沒道理阿)。
因為漏的情形大部分是配 separating gel 的時候,用 isobutanol 壓會有
一邊垮下去,看起來好像是漏掉了,可是看那個墊子又沒有東西漏出來的樣
子。有沒有可能是膠凝固的不均勻所導致的呢?(大片的膠尤其容易這樣)
我之後把膠配好在 load 膠前一定會把他攪拌均勻 (可以用個燒杯放 stirr)
這樣子看起來漏膠的情形就少了許多。
不過我也不確定就是了,有時候運氣好怎麼亂作的膠都好好的,有時候運氣背
做出來的膠就鳥掉.....orz
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◆ From: 140.127.160.142
推
07/09 15:11, , 1F
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