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3F→:你的英文部分是屬名種名,中文部分是俗名,系統不一樣...03/11 08:24
3F推:樓上你抽DNA的方法有問題,marker有出來就不會是膠的問題03/09 16:54
4F→:260/280 1.2請重做,這種數值有相當大的問題是沒抽出來03/09 16:55
7F→:我想是因為連他們內部寫網頁的負責人都不知道自己在做啥吧XD03/09 16:49
7F推:有何優勢的問題您比較一下參與的酵素以及其功能就會了解03/11 08:22
1F推:有看到marker嗎?不管在transfer或是SDS-PAGD上?03/04 00:35
6F推:如果切位可以接的上去的話就可以,多挑一些一定挑得出來03/03 22:40
7F→:buffer跟原先vector的干擾都不會有問題,挑對大小的plasmid03/03 22:42
8F→:就OK...03/03 22:42
9F→:另外insert濃度太低,以commercial vector養菌放大再剪切回收03/03 22:44
10F→:就可以放大濃度...03/03 22:45
14F推:cDNA若不是單股,一定可以T/A cloning,即使是RACE或是RT出來03/04 00:26
15F→:的經過養菌放大的質量都比P多管PCR產物回收來的好03/04 00:27
16F→:與其一開始搞個難題去衍生後續實驗的麻煩,不妨考慮一下03/04 00:28
17F→:一開始在前期得到大量精確的DNA順順的作下去,參考一下^^03/04 00:31
18F推:當然如果PCR就可以得到大量產物的話PCR就好,原po的問題03/04 00:50
19F→:若是PCR出來的band或是經由非PCR方式得到cDNA的話,建議養菌03/04 00:51
20F→: ^band很少^03/04 00:52
3F推:1.先檢查His-Tag有沒有in frame 2.直接黏在蛋白後表現的His03/04 00:42
4F→:Tag有時候因為跟前面的蛋白太近會干擾其純化效率03/04 00:43
5F→:3.Tag若包在inclusion body內=無解,請拿soluble form試試03/04 00:45
1F推:政府對產業的問題不是沒有錢,而是要如何配套不被政客汙錢03/03 22:36
3F推:雖然不太可能,有重新稀釋過buffer用嗎?03/03 11:31
24F推:藍白colony不成比例,可參考一下trouble shooting中的方法03/04 01:02