[求救] western blot的小蛋白質...

看板Biotech作者 (逼愛撫)時間17年前 (2009/03/03 23:57), 編輯推噓4(404)
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想請問大家... 有沒有人跑過15kd以下的小蛋白質western blot呢? 我現在遇到一個窘境... 就是我從組織抽出來的protein拿來跑膠 15kd以下的蛋白質都會不見...嗚哇~ 這倒底是為什麼啊~~~ 我染過coomassie blue也染過ponceau s 可是小分子的都看不到>"< 我的條件如下... .1.0mm minigel .一般SDS-PAGE和Tricine SDS-PAGE都跑過 結果一樣... .80V→130V .sample都有1:1加loading buffer 加熱95℃ 5~10分鐘 .確定沒跳海... .確定不是transfer的問題... 有沒有高手有辦法解決啊 愈做愈無力了... -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 119.77.163.157

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有看到marker嗎?不管在transfer或是SDS-PAGD上?
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?? %-SDS-PAGE 我都用22%.
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實驗室有錢又不想浪費精力在這種抓條件western上的話
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直接去買gradient gel搭配不同buffer..
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現在用的Invitrogen NuPAGE配MES buffer連3K都分的
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很開 不過一片gel相當於吃一頓燒肉屋就是了- -
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membrane 孔徑大小多少?
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pall的 0.2um PVDF
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