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作者 ksn 在 PTT 全部看板的留言(推文), 共344則

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[求救] 關於pCAMBIA vector construct的問題

[ Biotech ]3 留言, 推噓總分: +1

作者: VieraWei - 發表於 2010/05/11 22:53(14年前)

1^F推ksn:接在MCS(須查有哪些切點) 1302 map沒畫出mgfp5 gene 存疑XD　05/13 00:53

2^F→ksn:可能還是要找一下vector sequence 確認切點跟螢光基因的存在05/13 00:54

3^F→ksn:http://ppt.cc/ngua05/13 00:58

[求救] 有關gel extraction

[ Biotech ]28 留言, 推噓總分: +4

作者: blueashin - 發表於 2010/03/29 14:38(14年前)

16^F→ksn:檢視一下protocol，WS buffer有無加入酒精，WS buff 離心完後03/29 22:52

17^F→ksn:需要不加buffer全速空轉三分鐘去除WS的酒精成分03/29 22:54

18^F→ksn:膠不要超過2%，總重在200mg較佳。切膠是盲切還是在X光台下?03/29 22:55

19^F→ksn:我昏頭了XD 我是指UV光台 XD03/29 22:56

20^F→ksn:預熱60度C回收大於5k片段時利用，小片段使用一般水2~3min即可03/29 23:00

過年除舊佈新，換顆燈泡讓居家照明氣氛變好~~~真方便

[ share ]4 留言, 推噓總分: +1

作者: gase0208 - 發表於 2010/02/06 17:22(14年前)

3^F→ksn:那只好推歐司朗了XD02/07 10:47

[閒聊] 買東西時還是要注意產品的內容與來歷

[ Biotech ]4 留言, 推噓總分: +2

作者: jdj - 發表於 2010/01/30 02:03(14年前)

4^F推ksn:有找一下參考資料,廠商這樣標示應該錯誤 http://0rz.tw/PGejj01/31 00:08

[塔羅] 你會選什麼樣的童話書給小朋友看呢？

[ Mind ]145 留言, 推噓總分: +139

作者: zuki78 - 發表於 2010/01/25 05:39(14年前)

73^F推ksn:溫馨^^01/27 00:03

Re: [求救] 請問各位'

[ Biotech ]4 留言, 推噓總分: +2

作者: jsi - 發表於 2010/01/23 11:45(14年前)

2^F推ksn:我有個問題是pfu 3'to 5' exonuclease 活性會不會 remove 掉第01/23 14:12

3^F→ksn:第二股的3'到 5' 段? @ @01/23 14:12

4^F→ksn:感謝，應該是我想錯了若完全互補應該沒有問題~01/23 14:19

[求救] clone不出來

[ Biotech ]14 留言, 推噓總分: +2

作者: jck0406 - 發表於 2010/01/16 18:28(14年前)

5^F推ksn:plasmid用enzyme雙切看1kb band有沒有出來。PCR primer本來就01/17 16:04

6^F→ksn:夾不出single band了，用來check plasmid感覺不好用@ @01/17 16:05

7^F→ksn:或是單切plasmid看大小有沒有比vector only大1kb，若都沒有，01/17 16:07

8^F→ksn:再考慮上面實驗的問題01/17 16:08

11^F→ksn:唔..抱歉~習慣用語意思是指PCR產物跑膠會產生很多條band01/17 23:46

12^F→ksn:文章開頭因為多條band必須進行gel extraction，若用相同primer01/17 23:51

13^F→ksn:及條件進行最後plasmid確認的話，認為不太能確定有沒有成功~01/17 23:52

14^F→ksn:這邊只是開頭想先確認是PCR的問題還是 clone 方式的問題01/18 00:05

[求救] 請問關於抽取plasmid的問題

[ Biotech ]32 留言, 推噓總分: +12

作者: syming - 發表於 2010/01/12 19:48(14年前)

14^F→ksn:回收膠wash完後column membrane正中央滴入elution 或ddH20,01/13 00:42

15^F→ksn:室溫靜置2~3分鐘後再離心。若是DNA後續有clone處理，建議用水01/13 00:43

16^F→ksn:唔..kit回收膠片最後wash完，DNA是在membrane上，非Wash buf中01/13 00:45

17^F→ksn:看來抽plasmid問題可能一樣，kit最後Elution步驟和傳統法差異01/13 00:50

[求救] Enzyme digestion 一直切不到但Plasmid PCR有band!!!

[ Biotech ]40 留言, 推噓總分: +9

作者: nikki0415 - 發表於 2009/10/22 14:53(14年前)

24^F推ksn:EcoRI那邊有點怪，切一刀會產生正確大小的single band，切不到10/22 23:43

25^F→ksn:則是位置較低的supercoil form(明顯)10/22 23:44

[求救] 使用限制脢酵素切DNA很一直切不到

[ Biotech ]5 留言, 推噓總分: +1

作者: eno819 - 發表於 2009/10/20 19:09(14年前)

4^F→ksn:請問有電泳圖嗎? 另外其他的酵素用了哪些呢?沒切到看起來band10/21 01:01

5^F→ksn:的情況是如何呢??10/21 01:02

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