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作者 cin 在 PTT [ Biotech ] 看板的留言(推文), 共40則

限定看板：Biotech

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Fw: [問題] 請教製備抗體的生技公司

[ Biotech ]6 留言, 推噓總分: +2

作者: tutj - 發表於 2011/11/10 03:34(14年前)

3^F→cin:我們家合作過幾家推濁水溪11/15 21:46

4^F→cin:不管跟哪一家 QC自己還是要盯著11/15 21:46

[求救] 收磷酸化蛋白問題

[ Biotech ]14 留言, 推噓總分: +5

作者: wayne841503 - 發表於 2011/11/07 13:50(14年前)

8^F→cin:phospho-protein最好要用細胞凍-80度不要用protein lysate凍11/15 21:37

9^F→cin:即使有加 phosphotase inhibitor的lysate11/15 21:37

10^F→cin:有些比較敏感的phopho-protein 一樣會掉11/15 21:37

11^F→cin:你所說的方法比較好只是記得要把上清液吸乾一點11/15 21:38

12^F→cin:當然新鮮做最好不過還是先去冰-80度11/15 21:40

13^F→cin:確保所有時間點的細胞都被凍住了 (約五-十分鐘) 再拿出來lyse11/15 21:41

14^F→cin:做time course放冰上關signal是不夠的.有些apoptosis訊號會出11/15 21:42

[討論] 有關禁食測血糖、胰島素

[ Biotech ]7 留言, 推噓總分: 0

作者: DEITY0413 - 發表於 2011/11/03 00:16(14年前)

6^F→cin:還要看鼠的飼料如何建議不要太久12小時試試11/03 22:54

7^F→cin:若WT的血糖在正常fasting數值就可以固定下來了11/03 22:55

[討論] IP control的抉擇

[ Biotech ]1 留言, 推噓總分: 0

作者: xenosaga1026 - 發表於 2011/11/01 11:10(14年前)

1^F→cin:vector-Myc 以Nyc-beads IP 為一組另一組是你的2.11/01 20:47

[求救] western壓片全黑

[ Biotech ]24 留言, 推噓總分: +7

作者: eyest - 發表於 2011/10/28 10:45(14年前)

20^F→cin:ECL有換過嗎? 是不是太強了?10/31 20:03

[求救] 跑flow用的一抗和二抗用什麼稀釋？

[ Biotech ]5 留言, 推噓總分: +1

作者: FireHell - 發表於 2011/10/15 20:06(14年前)

4^F→cin:打過洞要用perm/wash buffer10/17 21:57

5^F→cin:含皂素維持孔洞10/17 21:58

[求救] western小分子蛋白壓不到QQ

[ Biotech ]41 留言, 推噓總分: +3

作者: spirithorse - 發表於 2011/10/12 15:44(14年前)

5^F→cin:倒底在問PCR還是WB? 怎麼上面幾個都在講 cycles?10/12 16:49

6^F→cin:還有 transfer是哪一種 semi-dry? 還是濕式10/12 16:50

7^F→cin:另 "跑了"一半就收跑是指 running不是transfer吧?10/12 16:50

8^F→cin:如果是running跑了一半好像跟有沒有transfer過去沒有關係10/12 16:51

10^F→cin:我看您貼的兩張圖我認為是transfer跳海10/12 19:12

11^F→cin:不用看bands 請看一條條的背景小分子的位置連背景都沒了10/12 19:13

12^F→cin:我推測是小分子在transfer跳海10/12 19:13

13^F→cin:transfer時每個分子都是像火車過山洞一樣10/12 19:14

14^F→cin:要讓想要的分子之車箱剛好停在membrabe山洞中10/12 19:15

15^F→cin:那該分子的車廂多寡(量多) 速度(分子小較快膠濃又慢一點)10/12 19:16

16^F→cin:都要考量再調一下條件吧10/12 19:17

17^F→cin:最好有positive control 才知道不是該蛋白沒表現10/12 19:20

[求救] 為什麼glucose tolerance test越測越高

[ Biotech ]6 留言, 推噓總分: 0

作者: goralie - 發表於 2011/10/04 20:31(14年前)

1^F→cin:會不會真的生病了 insulin resistance10/04 21:26

2^F→cin:我都是現配glucose10/04 21:26

3^F→cin:多測一個１２０min就知道有沒有降了10/04 21:27

4^F→cin:i.p.本來就會稍微慢一點點(比OGTT)10/04 21:28

5^F→cin:同時收一些blood 測serum insulin算算看 insulin resistance10/04 21:30

6^F→cin:請您將數值貼出來不然很難判斷10/04 21:31

[求救] western blot問題

[ Biotech ]35 留言, 推噓總分: +10

作者: JaShih - 發表於 2011/09/29 19:20(14年前)

6^F→cin:marker有過嗎? 180kd不是太好transfer 我也覺得是tran的問題09/29 22:44

7^F→cin:你用哪一種transfer semi-dry還是濕式09/29 22:44

8^F→cin:ECL不用放那麼久09/29 22:45

9^F→cin:二抗太濃 1:6000起跳09/29 22:46

22^F→cin:我覺得應該用6% gel 壓片沒有bands應該壓幾小時才算數09/30 10:47

23^F→cin:看J的描述問題應該真的是在transfer09/30 10:48

24^F→cin:tran完應該整片的protein (marker)90%都要過去09/30 10:48

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