看板 [ Biotech ]
討論串[求救] PCR P不出來
共 3 篇文章
內容預覽： 開啟 | 關閉 | 只限未讀
首頁
上一頁
1
下一頁
尾頁
#1
[求救] PCR P不出來
推噓6(6推 0噓 12→)留言18則，0人參與, 最新作者kikixie (跟著我走你會迷路)時間11年前 (2012/08/28 14:55), 編輯資訊
0
0
0
內容預覽:
我設計了一組 primer 並利用 Biomix 找到 Tm =56.6度 (基因size:787bp). 條件如下:. 95度10min-->95度30s,56.6度1min,72度1min(40cycle)-->72度10min-->4度. 結果...利用相同條件，只換 enzyme !!!.
(還有211個字)
#2
[求救] PCR P不出來
推噓4(4推 0噓 14→)留言18則，0人參與, 最新作者ai760721 (蜜汁排骨飯)時間10年前 (2013/11/28 17:24), 編輯資訊
1
0
0
內容預覽:
各位大大好. 事情是這樣的. 我從FFPE的sample中抽取出了gDNA. 要從裡面去P某段可能有mutation的地方. 位子是在某個基因的Promoter靠近ATG的地方約100多bp. 但是陸陸續續P了一個多月 始終都是P不出來. 試過以下方法. 增加DNA的量、Dilute DNA、通PC
(還有425個字)
#3
Re: [求救] PCR P不出來
推噓2(2推 0噓 3→)留言5則，0人參與, 最新作者ljii (是否)時間10年前 (2013/11/29 05:10), 編輯資訊
0
0
0
內容預覽:
個人建議,. 1. 換polymerase. 有時後有些產物taq就是不喜歡, hot start也沒有差別. 2. try touch down PCR. 3. 確定你的genomic DNA的品質, extraction時有沒有把EtOH洗乾淨. 4. 確定PCR reagent是fresh的,
(還有485個字)
首頁
上一頁
1
下一頁
尾頁