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討論串[求救]bisulfite Genomic PCR疑問
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#4
Re: [求救]bisulfite Genomic PCR疑問
推噓0(0推 0噓 2→)留言2則，0人參與, 最新作者cutebetty (Qb)時間13年前 (2012/09/16 02:01), 編輯資訊
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我這陣子有做三批bisulfite的PCR. 第一次做try得要死才做出來. 後來買了Hotstart的PCR mix. 結果後來連anneling溫度都不用測就可以P出專一的band. 避免幫廠商打廣告 如果有需要的可以站內信問我是用哪支Taq. 希望可以幫到大家 ^^. --. ※ 發信站: 批
#3
Re: [求救]bisulfite Genomic PCR疑問
推噓0(0推 0噓 10→)留言10則，0人參與, 最新作者travelmat (草蓆)時間13年前 (2012/09/06 16:57), 編輯資訊
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其實我也有同樣問題.... 我之前也是有TRY到一個比較好的條件. 僅管做出來一樣是smear一片，但相對明顯有一條專一性的band(size是我要的). 本來預期是以為這樣的condition是非常OK的. 於是接下來的sample嘗試以同樣condition下去跑. 卻發現不同sample間無法
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#2
Re: [求救]bisulfite Genomic PCR疑問
推噓3(3推 0噓 2→)留言5則，0人參與, 最新作者monicatsen (monicatsen)時間13年前 (2012/09/05 21:22), 編輯資訊
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我後來跑出來了!. 但其實就很奇妙 抓不出PCP成功and不成功的原因XD. 給大家參考一下:. 轉Bisulfite改用2ug去轉-->產物10ul-->取4ul(用260推算濃度,則是130ng左右). -->去PCR跑溫度梯度. 這個條件的產物跑膠超明顯. 但同一批的Sample同條件. 我隔
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#1
[求救]bisulfite Genomic PCR疑問
推噓2(2推 0噓 5→)留言7則，0人參與, 最新作者monicatsen (monicatsen)時間13年前 (2012/08/15 17:46), 編輯資訊
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想請問有在做DNA bisulfite PCR的各位. 我目前的實驗構想. 是想去看在表現我目標基因的細胞. 在一些stemness上甲基化程度是否受到影響. 所以我的實驗流程如下:. bisulfite sequence. 1.抽control及表現我目標基因細胞的gnomic DNA. 2.ZY
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