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討論串[求救] Vector only 的 control 比 vector + i …
共 9 篇文章
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#9
Re: [求救] Vector only 的 control 比 vector + i …
推噓1(1推 0噓 3→)留言4則，0人參與, 最新作者boblu (六百)時間15年前 (2010/08/13 22:06), 編輯資訊
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vector only no ligase, 1.5ng DNA + 4uL competent cell 的盤子長兩顆. vector only + ligase 的盤子長了九顆. 另有塗五倍的盤子結果也呈比例. 這樣應該算可以接受的 vector 品質了？. (之前都幾百顆）. 等一下下午去作真
#8
Re: [求救] Vector only 的 control 比 vector + i …
推噓1(1推 0噓 5→)留言6則，0人參與, 最新作者boblu (六百)時間15年前 (2010/08/12 00:24), 編輯資訊
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新抽了一管 vector, 225ng/uL. 打算double digest 這樣做：. vector: 11uL (~2.5ug). Enzyme: 2uL (10U/uL) each. ^^. 應該是20. EcoRI buffer: 4uL. BSA: 0.4uL. Water: 20.6u
(還有478個字)
#7
Re: [求救] Vector only 的 control 比 vector + i …
推噓2(2推 0噓 8→)留言10則，0人參與, 最新作者boblu (六百)時間15年前 (2010/08/11 09:49), 編輯資訊
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我現在不是作 TA 是要接到 double digested 的 vector 裡面啊. kit 建議的用量是 vector 50ng, insert 三倍分子數啦. 切 3ug, 回收 2.2ug, 回溶 40uL 剛剛好濃度啊. RE 一種放 1uL (10U) 理論上只作用一小時不是都超量超很
#6
Re: [求救] Vector only 的 control 比 vector + i …
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者boblu (六百)時間15年前 (2010/08/10 23:05), 編輯資訊
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更新報告：. double digested vector, no ligase 的也長了一些. double digested vector with ligase 的長了一堆. vector + insert 的 跟 double digested vector, no ligase 差不多.
(還有100個字)
#5
Re: [求救] Vector only 的 control 比 vector + i …
推噓0(0推 0噓 10→)留言10則，0人參與, 最新作者boblu (六百)時間15年前 (2010/08/10 03:45), 編輯資訊
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我想要用的那個 vector 序列上確定有酵素切位. 但是沒錯 我現在就是在懷疑：. 手上這管不是我抽的 midiprep 到底是不是標籤上寫的那個東西 以及品質如何. gel 上看起來大小是對 而且也很純. 可是我們 lab 本來就有好幾支相關的衍生 vector. 另外也不知道 buffer 裡
(還有189個字)
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