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討論串[求救] 切片破洞很久了!!!請幫幫我
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#5
Re: [求救] 切片破洞很久了!!!請幫幫我
推噓0(0推 0噓 1→)留言1則，0人參與, 最新作者lenti (啄木鳥)時間16年前 (2010/02/08 13:31), 編輯資訊
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以前我待過的lab是做SMN的, 常要切spinal cord, 你的問題我遇過,. 出現很多破洞.. 切spinal cord, 做perfusion還是比不做perfusion切的效果更好，. 雖然這個流程很花時間。. 會出現破洞的原因是出在perfusion時的灌流速度過快所致，. 由於灌流速
#4
Re: [求救] 切片破洞很久了!!!請幫幫我
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者jsi (jsi)時間16年前 (2010/02/06 00:40), 編輯資訊
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查看一些網站spinal cord cross section及spinal cord fluorescence圖片後猜測，. 或許您切的組織沒有破，可能是目前使用的方法結果就是這樣。. 但這些都僅是猜測，務必要進一步實驗確認。. 若可使用其它染色法來確認目前空洞處是真的沒東西存在，或是有東西存在.
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#3
Re: [求救] 切片破洞很久了!!!請幫幫我
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者vandia (有點累了)時間16年前 (2010/02/05 13:26), 編輯資訊
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因為沒有明視野的照片 還有照片倍率？. 其實有點難看出破洞的地方到底是破洞還是空洞. 我是沒有切過脊椎. 不過我有一個小小問題想請教. 切片組織是脊椎. 那做perfusion的意義在哪邊？. 我知道要做一些充血組織或是血管內皮是一定要灌流. 可是脊椎那邊有血管嘛？. 我的意思是灌流的成效可以到達s
(還有68個字)
#2
Re: [求救] 切片破洞很久了!!!請幫幫我
推噓1(1推 0噓 2→)留言3則，0人參與, 最新作者pei24 (黑哥)時間16年前 (2010/02/04 15:38), 編輯資訊
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To 前輩們.... 我把我切片染色的照片 po 在 http://www.wretch.cc/album/peipink. 麻煩前輩們給予指教...... 我實驗室的perfusion protocol為以下. saline 50 ml(流速約為 6 ml/min). 4% PFA 100-200
(還有125個字)
#1
[求救] 切片破洞很久了!!!請幫幫我
推噓1(1推 0噓 5→)留言6則，0人參與, 最新作者pei24 (黑哥)時間16年前 (2010/02/04 00:08), 編輯資訊
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請問各位實驗經驗豐富的前輩. 1. 組織可以不經由perfusion,直接取下來泡在 4% PFA內嗎???. 泡完 4% PFA之後再泡30% sucrose....再進行冷凍切片. 2. 組織是小鼠的spinal cord L4-L6, 這樣泡在 4% PFA內至少需要多少小時??溫度??. -
(還有130個字)
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