[求救] 切片破洞很久了!!!請幫幫我

看板Biotech作者 (黑哥)時間14年前 (2010/02/04 00:08), 編輯推噓1(105)
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請問各位實驗經驗豐富的前輩 1. 組織可以不經由perfusion,直接取下來泡在 4% PFA內嗎??? 泡完 4% PFA之後再泡30% sucrose....再進行冷凍切片 2. 組織是小鼠的spinal cord L4-L6, 這樣泡在 4% PFA內至少需要多少小時??溫度?? ------------------------------------------------------- 由於我的切片破片已經持續一個半月了 我不想再繼續破下去了.. 覺得perfusion很耗時 因此才想說有沒有可以不經由perfusion直接來個固定的方法? 希望各位前輩給予指教... PS:依照我實驗室的perfusion protocol,一隻小鼠需要耗時1.5小時 實在是很耗時...../_\ (一天灌個幾隻就天黑了) -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 192.192.93.175

02/04 10:36, , 1F
1.可以,可是組織內的氣泡要完全弄出來(可低壓抽氣)
02/04 10:36, 1F

02/04 10:37, , 2F
2.你是一整條嘛? 組織太大塊固定效果也不好,要不要切小塊
02/04 10:37, 2F

02/04 10:39, , 3F
切片破洞的原因可能有很多,你有沒有先確定不是其他問題?
02/04 10:39, 3F

02/04 10:39, , 4F
比如說,刀片太鈍...之類的
02/04 10:39, 4F

02/04 10:40, , 5F
可以給我看看你切片破洞的照片嘛? 這樣比較好推測
02/04 10:40, 5F

02/04 11:07, , 6F
我大鼠一隻大概30~40分 你要一個半小時????
02/04 11:07, 6F
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