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討論串[求救] IHC 不太順利
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#6
Re: [求救] IHC 不太順利
推噓1(1推 0噓 1→)留言2則，0人參與, 最新作者lenti (啄木鳥)時間17年前 (2009/04/01 20:06), 編輯資訊
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脫落的問題, 我們曾經有試過不同廠牌的玻片,. DAKO Silanized Slides (Silane Coating) Code No. S3003. 的玻片是耐得起煮沸而不容易脫落的, 如果可以就從切吧.(可以跟永吉訂). 另外, 還有其他的 Antigen retrival 的方法可用..
(還有594個字)
#5
Re: [求救] IHC 不太順利
推噓2(2推 0噓 6→)留言8則，0人參與, 最新作者YuDavid (討厭失眠)時間17年前 (2009/04/01 14:04), 編輯資訊
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autoclave的時候 泡著真的會脫落 昨天我就沒有泡著. 只是放在潮濕的buffer的鐵盒子裡拿去autoclave. 當然 都沒有做出來 哀. 後來我用微波爐加熱到沸 再把slide泡進去 過一分鐘後拿出. 再把buffer微波到沸 循環了七八分鐘左右. 也是沒有很成功ˊˋ. 抗體是學姊給的
#4
Re: [求救] IHC 不太順利
推噓1(1推 0噓 0→)留言1則，0人參與, 最新作者HenDa (優質射手)時間17年前 (2009/04/01 13:38), 編輯資訊
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以antigen retrieval來說的話. 用微波爐做為熱源應該是要盡量避免. 因為受熱不均勻又有沸騰的問題. 除了怕脫落外 buffer的濃度與pH也較容易改變. 一般病理科都會買IHC專用的壓力鍋. 市面上有賣專用的壓力鍋 不過那個一個好像四,五萬以上. 省錢的做法就是用autoclave.
(還有278個字)
#3
Re: [求救] IHC 不太順利
推噓1(1推 0噓 5→)留言6則，0人參與, 最新作者YuDavid (討厭失眠)時間17年前 (2009/03/31 20:59), 編輯資訊
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筆記本放在實驗室 所以protocol 可能書寫不是很正規...請見諒. 1. Deparaffinze sections and rehydrate as follows. xylene for 5'. 100% ethanol for 3'. 95% ethanol for 3'. 80%~~.
(還有977個字)
#2
Re: [求救] IHC 不太順利
推噓1(1推 0噓 3→)留言4則，0人參與, 最新作者allisa (小晴)時間17年前 (2009/03/30 23:59), 編輯資訊
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我之前也是這樣 有兩個方法可以試試. 一個是用加壓滅菌鍋做retrival 跟滅菌一樣的溫度 5~15分鐘. 一個是將slide平放 用微波爐加熱 缺點是一次只能放個幾片 因為片子不能重疊. buffer 蓋過slide再多一些(約1cm)即可 不要放太多 微波5分鐘. 再不行可能就是coating
(還有41個字)
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