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討論串[問題] EMSA做不出supershift
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#5
Re: [問題] EMSA做不出supershift
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者aggaci (reject！又reject！)時間19年前 (2007/04/17 22:40), 編輯資訊
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你如何知道呢？satacruz的datasheet不準，他每隻都說可以. 如PAPER已經發表的確定此段DNA CREB一定可以binding. 或是你用的competitor 你不是說你有CREB的oligonucleotide嗎？. positive control？懂嗎？. 舉個例子. 若此C
(還有232個字)
#4
Re: [問題] EMSA做不出supershift
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者lysa (上台北了)時間19年前 (2007/04/17 21:34), 編輯資訊
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我買的Ab是sc-186x,所以應該是可以做EMSA的. positive control ~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~. 這我不太懂,要怎麼確定這probe是creb一定可以binding的?不是要用Ab check嗎?. paper看過了...所有的情況都有試過
(還有69個字)
#3
Re: [問題] EMSA做不出supershift
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者pcboy (妞)時間19年前 (2007/04/17 17:45), 編輯資訊
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若是你的抗體會競爭該蛋白與DNA的鍵結. 那是不是就沒辦法看到 band shift. 思考一下再補上前面板友的建議與對照實驗. 加油~. --. ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc). ◆ From: 140.112.122.9.
#2
Re: [問題] EMSA做不出supershift
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者aggaci (reject！又reject！)時間19年前 (2007/04/17 16:15), 編輯資訊
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先確定你的AB可以作EMSA. positive control. 用CREB鐵定會binding的probe作EMSA，再測試Ab能否supershift成功. 看PAPER用這隻抗體都是用什麼條件？. 先加抗體？後加抗體？跟probe一起加？放冰上嗎？. --. ※ 發信站: 批踢踢實業坊(pt
#1
[問題] EMSA做不出supershift
推噓0(0推 0噓 1→)留言1則，0人參與, 最新作者lysa (上台北了)時間19年前 (2007/04/17 15:34), 編輯資訊
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請問EMSA做不出supershift會是什麼問題ㄋ??. antibody已經用IP證明可以跟protein binding. 改變cold probe濃度以及mutant probe都可以看到band的改變. 不曉得問題出在哪邊???. --. ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc). ◆
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