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討論串[問題] PCR, Tm值差很多的primer
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#3
Re: [問題] PCR, Tm值差很多的primer
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者kuan.時間18年前 (2007/04/12 08:17), 編輯資訊
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※ 引述《Porkcan.bbs@ptt.cc (Threatening)》之銘言：. > ───────────────────────────────────────> 手上有一組primer. > annealing temperature最佳是60度啦. > 不過有試過到40度也可以做的出來
(還有252個字)
#2
Re: [問題] PCR, Tm值差很多的primer
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者kuroo (新資料爽)時間19年前 (2007/04/11 13:50), 編輯資訊
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有種PCR方法是分開做. 先用一條Primer做出單股. 再加入另一條Primer繼續跑另一組Cycle. 做出另外一股. 這樣就可以設定個別最佳的Tm囉. 不然就把Tm低的primer序列延伸. 看能不能多弄幾個GC. 這樣在Elongation的溫度下. Oligo d(T)不會飛走嗎？ @@"
#1
[問題] PCR, Tm值差很多的primer
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者Porkcan (Threatening)時間19年前 (2007/04/11 02:26), 編輯資訊
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手上有一組primer. annealing temperature最佳是60度啦. 不過有試過到40度也可以做的出來. 我想要拿其中的Forward或是Reverse primer來跟oligo d(T)配成一對進行PCR. 但是Oligo d(T)的溫度似乎很低 25度?. 不知道這樣兩個pri
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