Re: [求救] HIF-1a 的western 條件
不好意思，借標題想請問一下
各位前輩用的缺氧裝置是市售的缺氧chamber，
還是是自己利用幾塊壓克力板自行製作呢？
還是是用CoCl2 induce呢？
感謝各位~
※ 引述《aggaci (可找我下棋..)》之銘言：
: ※ 引述《Basketball (future)》之銘言：
: : 最近在跑HIF-1a
: : 不知道是不是transfer的問題還怎樣
: : 一下壓得出來同樣sample同樣condition又壓不出來
: : 不知道版上是否也有人在跑HIF-1a的能否給我些意見
: : 我使用是8%下膠 3%上膠
: : transfer是使用濕式 400mA 70分鐘 (實驗室學姐之前用此條件跑iNOS 130KDa都有跑出來)
: : gel用comassin blue染後確定有transfer過去
: : memb.用麗春紅染有淡淡的protein(所以不知道是不是transfer條件不好?)
: : 壓出來有時候有 有時候沒有
: : ECL 也用過advance的 也壓不出來
: : sample 每well load 50ug(是細胞的 所以應該算load夠多了)
: : 總之 請有在跑HIF-1a的給我些建議
: : 謝啦.
: 對不起
: 借問一下
: 我問到HIF1a的抗體大部分都只認人類的HIF1a
: 老鼠的部分 datasheet都說不確定
: 剛好我的細胞是老鼠的細胞(MEF)
: 所以不曉得是否有板友能推薦比較好的抗體??
: BD的有人說不錯 但可以認老鼠的HIF1a嗎?
: 謝謝
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.130.98.82
推
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