Re: [求救] BCA與Bio-Rad protein assay kit....

看板Biotech作者時間15年前 (2010/08/13 13:05), 編輯推噓0(000)
留言0則, 0人參與, 最新討論串3/3 (看更多)
※ 引述《Fourfish (~四條魚~)》之銘言: 先感謝四條魚一同來討論~ : 不知道你用BCA測的很高是有多高? : 你應該有換算出sample的濃度吧? 我之所以沒有辦法換算出濃度是因為超過我自製的檢量線範圍了, 我所配置的檢量線並不是參照說明書上的做到1500 ug/ml 而是先做到500 ug/ml,在這個濃度下BCA的吸光值是0.772, 而我後續有些蛋白質的分析中,吸光值都已經破2.0了, 當然我知道這樣的相對比較並不準確, 不過至少濃度應該是有超過500 ug/ml的。 : 就你所說得靈敏度來看 : BCA: 0-100 ug/ml : Bio-Rad: 200-900 ug/ml : 中間100-200很明顯有個落差在 : 如果sample有110 ug/ml或190 ug/ml : 對BCA來說都是爆表 但對Bio-Rad來說都是不足量 : 所以你怎麼會覺得sample的濃度不會低於Bio-Rad的最低極限200 ug/ml? 很不好意思我在描述上可能會造成誤導,BCA超過100 ug/ml並不會爆表, 我只是想要描述BCA這個Kit在低濃度也有很好的線性關係, 這點是Bio-Rad Kit不敢保證的部份,所以他最低建議 200 ug/ml, 同上面解釋過的,我想我感到疑惑的部分應該不是落在那個模糊的濃度區間內。 : 還有 實驗做法可以再說明清楚一點 : 因為就算是同一套測濃度的試劑 : 裡面也有不同的做法 大量跟微量的做法是有差異的 我有注意到兩個Kit中都有提到試管跟微盤的分析方式, 我兩者都是採用試管分析的方式來做比較的,不過結果卻有天大的差異, 真的讓我相當苦惱.... -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.120.29.39
文章代碼(AID): #1CPDAnHH (Biotech)
文章代碼(AID): #1CPDAnHH (Biotech)