[求救] BCA與Bio-Rad protein assay kit....

看板Biotech作者azywu時間15年前 (2010/08/13 12:07)推噓3(3推 0噓 8→)

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各位版友你們好，小弟是個非生科相關科系的研究生，自認為沒有深厚的分子生物背景，所以請大家多多包含。小弟最近遇到了一個實驗上的問題，自己感覺到相當的奇怪，實驗目標是針對某株細菌在培養的過程中監測上清液中的蛋白物質，小弟使用了BCA protein assay kit在不同的培養時間採樣分析，上清液都經過了0.22過濾頭過濾掉懸浮的細菌才分析，控制組的培養基也有進行同步的蛋白物質監測，實驗的結果顯示培養時間越長上清液中會累積蛋白物質，而且以BCA protein assay所分析到的濃度相當的高，不過小弟困惑的是，小弟以相同的樣品，改以Bio-Rad protein assay kit分析，其結果竟然是上清液中完全沒有任何的蛋白質物質，在595 nm的吸光值跟標準品的0點差不多。雖然BCA的偵測靈敏度(0-100 ug-BSA/ml-OK) 相對的較Bio-Rad(200-900 ug/ml-OK)的方法來的高，不過從實驗結果來看，BCA分析到的結果上清液的蛋白物質濃度應該很高，所以應該不至於低於Bio-Rad方法的偵測極限，這個問題真的讓小弟很苦惱，不知道該相信哪一個分析方法的結果.... 不知道各位版友有沒有遇過相似的問題，或是可否給小弟一點建議或是解釋? 先感謝各位版友的協助!! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.120.29.39

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inchew

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