Re: [討論] 有關Western的小問題

看板Biotech作者 (複合質體)時間14年前 (2010/04/30 01:27), 編輯推噓8(8推 0噓 11→)
留言19則, 10人參與, 最新討論串3/3 (看更多)
※ 引述《complexomic (複合質體)》之銘言： 我想問看看，有人做完後會回收一抗嗎??? 實驗室的其他人說一抗可以回收，最多做二~三次 二抗就不要回收，每次都泡新的 另外，如果是馬兜鈴酸對HK-2 cell的影響 屬於探討細胞骨架的實驗，用beta-actin當control 是否恰當，還是要用GAPDH比較好呢?? 感謝回答 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 219.68.157.5
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04/30 02:21, , 1F
可以回收的話就回收阿...抗體很貴的說...
04/30 02:21, 1F
推
04/30 04:33, , 2F
一抗其實可以回收很多次 二抗也可以回收兩三次
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04/30 04:34, , 3F
"很多次" 比較極端的定義是用到博士畢業
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推
04/30 07:30, , 4F
我用的synapsin I和neurofilament超強，有過30次以上的記錄
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04/30 11:15, , 5F
短時間使用回收ok 隔很久還是泡新的比較好
04/30 11:15, 5F
推
04/30 12:48, , 6F
可以reuse 二抗比較沒差吧 因為一抗很貴...
04/30 12:48, 6F
推
04/30 13:01, , 7F
1抗需要高專一性才夠格當1抗,所以貴,還能用就盡管reuse~
04/30 13:01, 7F
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04/30 13:02, , 8F
二抗便宜~所以才說不用省~不然~要reuse其實也是可以~
04/30 13:02, 8F
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04/30 13:02, , 9F
真的想省~就拿blocking用的牛奶繼續拿來泡2抗,一起省牛奶
04/30 13:02, 9F
推
04/30 20:47, , 10F
是可以回收 不過一般都是考慮實驗目的來絕定是否使用回收
04/30 20:47, 10F
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04/30 20:48, , 11F
打錯 是"決定"
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04/30 20:48, , 12F
因為如果是一般確認表現用的實驗 就用回收的
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04/30 20:49, , 13F
但是如果是重要data 還是會用新的 雖然理論上用回收也行
04/30 20:49, 13F
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04/30 20:49, , 14F
不過不會希望到時候做不出來或是做不好又多一個可疑原因
04/30 20:49, 14F
推
05/01 02:52, , 15F
我的原則也跟bluecsky一樣～一抗可回收多次
05/01 02:52, 15F
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05/01 02:52, , 16F
但重要實驗還是會用新泡的抗體
05/01 02:52, 16F
推
05/01 13:14, , 17F
我一抗都有回收但二抗都用新的，一抗回收後可用幾次隨著
05/01 13:14, 17F
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05/01 13:15, , 18F
著不同之抗體會不一樣，需要自己試驗，關鍵時刻不會用re的
05/01 13:15, 18F
推
05/02 04:19, , 19F
頂多一兩次吧 如果用牛奶泡很容易壞 實驗要因此重來不划算
05/02 04:19, 19F
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文章代碼(AID): #1BsS6PBD (Biotech)
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