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討論串[討論] 有關Western的小問題
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#3
Re: [討論] 有關Western的小問題
推噓8(8推 0噓 11→)留言19則，0人參與, 最新作者complexomic (複合質體)時間15年前 (2010/04/30 01:27), 編輯資訊
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我想問看看，有人做完後會回收一抗嗎???. 實驗室的其他人說一抗可以回收，最多做二~三次. 二抗就不要回收，每次都泡新的. 另外，如果是馬兜鈴酸對HK-2 cell的影響. 屬於探討細胞骨架的實驗，用beta-actin當control. 是否恰當，還是要用GAPDH比較好呢??. 感謝回答. --
#2
Re: [討論] 有關Western的小問題
推噓0(0推 0噓 1→)留言1則，0人參與, 最新作者reinherd (揚威利信徒萊因哈特)時間15年前 (2010/04/17 03:34), 編輯資訊
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你不先把medium 吸掉. 要如何PBS洗??. 我一直以為 PBS 是用來洗掉多餘的medium以及你不想要的死細胞. 因為medium內有大量的serum 蛋白 你不想看. RIPA的量不要加太大沒錯. 因為你這樣可以有比較高的蛋白質濃度. 我通常是加100~200ul 之間. 取決於cell
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#1
[討論] 有關Western的小問題
推噓1(1推 0噓 2→)留言3則，0人參與, 最新作者complexomic (複合質體)時間15年前 (2010/04/16 12:19), 編輯資訊
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我目前想要收細胞下來，然後破細胞，收集胞內蛋白. 之前跑2D是先將dish裡面的medium吸掉，再用PBS wash. 然後加入ripa 500uL 下去破細胞，然後酒精沉澱. 再用Rehydration buffer回溶，接著就上IEF，再上電泳. 目前我要做western，實驗室其他有做wes
(還有33個字)
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