Re: [求救] Western Blot出來的band不清楚
非常謝謝您的回文~~~~~
※ 引述《boblu (六百)》之銘言：
: 我很好奇 那些白點你怎麼這麼確定不是 transfer 有泡
: 以前沒有現在有 但是你各試過幾次呢？ 會不會是剛好沒夾好？
因為這張圖片是strip後再上的抗體,第一次是水痕嚴重但無白點
所以不是transfer造成的喔
還有一個問題是...以前有做出過水痕嚴重的結果,同時併有白點
不知白點和水痕之間會不會有關聯性呢??
: 所謂水痕可能性很多
: avtivate 不均勻, transfer 不均勻, block 不均勻都有可能
以上我都check過說....
同張membrane我剪成三塊分別接不同的抗體
就這個蛋白的抗體會這樣.....
我最擔心的是您的最後一句:它本來就可能長這樣 T_T
: 另外處理 membrane 的過程裡面有沒有不小心沾染油脂？
: 整個過程中使用的buffer 有沒有長什麼怪東西？
buffer很乾淨,新配好的
沒有沾到油脂 (但還是記下來!)
: band 模糊
: 另外 我注意到你的結果,
: target protein 下面還有一條 band（是intenal control嗎？）很漂亮
: 所以估計不是 PAGE run 不好的問題
: 一個可能是膠片的濃度不適當
很遺憾那條不是target之一
膠片的濃度不對是指在這個區域的膠片濃度不均,
還是要換別的濃度呢??
: 另一個可能則是你的 target protein 真的就是這樣......
: 訊號弱
: 版友建議的增加loading, 增加抗體同度，改變反應溫度與時間都可以試試看
: 不過也要考慮 "你要染的這個 protein 真的就是這樣" 這種可能性
嗯.......我今天要來努力了!!!!!!
先從增加loading開始好了
非常謝謝您!
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