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討論串[求救] Western Blot出來的band不清楚
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#4
Re: [求救] Western Blot出來的band不清楚
推噓4(4推 0噓 6→)留言10則，0人參與, 最新作者takumatw (那粒颱風)時間16年前 (2009/12/24 20:45), 編輯資訊
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你這問題我之前遇過,不要再猜了.... 1.你二抗用太高，因為二抗太高,訊號一下子就反應光了,不要再提高抗體濃度. 二抗用1:10000-15000，一抗就照原廠建議. 2.水痕是二抗太高造成的背景，不是transfer的問題，絕對不是!!!!!. 你再把cassette上夾membrane的膜再放
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#3
Re: [求救] Western Blot出來的band不清楚
推噓3(3推 0噓 1→)留言4則，0人參與, 最新作者soceress (贏了世界又如何)時間16年前 (2009/12/24 09:48), 編輯資訊
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非常謝謝您的回文~~~~~. 因為這張圖片是strip後再上的抗體,第一次是水痕嚴重但無白點. 所以不是transfer造成的喔. 還有一個問題是...以前有做出過水痕嚴重的結果,同時併有白點. 不知白點和水痕之間會不會有關聯性呢??. 以上我都check過說..... 同張membrane我剪成三
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#2
Re: [求救] Western Blot出來的band不清楚
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者boblu (六百)時間16年前 (2009/12/24 01:17), 編輯資訊
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我很好奇 那些白點你怎麼這麼確定不是 transfer 有泡. 以前沒有現在有 但是你各試過幾次呢？ 會不會是剛好沒夾好？. 所謂水痕可能性很多. avtivate 不均勻, transfer 不均勻, block 不均勻都有可能. 另外處理 membrane 的過程裡面有沒有不小心沾染油脂？. 整
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#1
[求救] Western Blot出來的band不清楚
推噓2(2推 0噓 15→)留言17則，0人參與, 最新作者soceress (贏了世界又如何)時間16年前 (2009/12/23 10:17), 編輯資訊
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http://www.wretch.cc/album/show.php?i=steniralc&b=2&f=1288829228&p=0. 箭頭所指的地方是我的target protein. blocking是用5% 脫脂奶 1hr. 一抗是1:1000 ,cell signaling的產品 ove
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