[求救] Recombinant protein in insoluble form
小弟最近在做protein expression的實驗，用的vector是pET30a和pGEX4T-1
第一次養的時候因為在養1ml的時候太早養，怕它長過頭所以流程變成：
1.pick 1 colony(pET/pGEX in BL21) in selective LB, incubate at 37℃(4hr)
2.In 4℃ refrigerator for ~2hr
3.dilute 100ul in 100ml of selective LB, incubate at 37℃ (~2hr)
↑不知道為什麼長很慢
所以養比較久。
4.Induction(1M IPTG 100ul)
5.Incubate at 37℃ (13hr)
結果最後induction和no-induction跑SDS-Page的結果看不出來有什麼不同，感覺沒有成功
induction，學長建議我改25℃其他condition不變再養一次試試看。
第二次的流程和第一次一樣，除了1ml的菌液沒有進冰箱，然後induction後改成25℃養，
這次induction就有起來(雖然我覺得我太晚induction了，覺得時機很不好拿捏……)，不
過做出來的protein都是insoluble form。
我應該要怎麼改下次養的condition比較有機會做出soluble form的protein呢？
．在板上看到有人把溫度降到18℃在養，這樣子是要養比較久是嗎？
．學長建議我把養的時間縮短看看會不會不是全部的protein都進inclusion body。
．老師覺得把Medium換成M9有機會做出soluble form，但是老師說他覺得我不管怎麼試機
會都不大Orz
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順便問一下，菌液的英文怎麼講啊……
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