Re: [求救] 關於protein purification

看板Biotech作者boblu (六百)時間17年前 (2009/01/13 09:15)推噓1(1推 0噓 4→)

留言5則, 1人參與討論串3/4 (看更多)

生看站死掉了用 PTT 回原 po 的狀況真的很微妙 denature form, 所以不太可能是 his-tag 沒有露出來有用其他的 his-tagged protein 跑過同樣的流程發現可以表示 protocol 大致沒有問題我想再問一下原 po 說有用 western 看過 lysate, flow through 跟 elute 用的是什麼抗體？是對你想純化的 protein 專一的抗體還是 anti his-tag 的? 因為我現在想到的的最後一個可能是雖然 construct 的序列正確但是 his-tag 或甚至是部分 C 端可能根本沒有被 translate 出來這樣就有可能你 PAGE 看起來好像正常用針對該 protein 專一的抗體染也可以染但是永遠純化不出來 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 122.116.69.32

推

theessential

01/14 06:22, , 1^F

01/14 06:22, 1^F

→

theessential

01/14 06:22, , 2^F

01/14 06:22, 2^F

→

theessential

01/14 06:23, , 3^F

01/14 06:23, 3^F