Re: [方法] 一樣想問萃取蛋白質的方法
※ 引述《amit (no)》之銘言：
: 想請問各位 如果要收很多的時間點
: 就要先把細胞先收集起來
: 我之前的方法是把盤子整個凍在-80
: 但是拿出來加lysis buffer的時候 體積會多出一倍多
: 所以參考了前面幾篇的方法 用PBS刮細胞再離心
: 可是我用1500rpm 離心十分鐘後
: 發現用tip吸supernatant 會有很多懸浮的細胞耶!!!!
: 感覺loss很多細胞>"< 而且我的細胞是primary culture原本就不多了
: 是不是我離心的轉速不對呢???
說我的方法
10公分盤 medium吸掉 (如果有懸浮或需要用的死細胞就收到15ML TUBE)
1ML PBS(可冰可不冰) wash 吸至 15ML TUBE
再加1ML PBS去刮 刮下來一樣收 TUBE
最後用1ML PBS wash一下盤子 收至TUBE
離心 1200rpm 5min 通常就OK了
如果這樣不行~那就只好把刮的1ML用eppendof離心
但這樣可能就要捨棄medium裡的細胞了
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