討論串[方法] 一樣想問萃取蛋白質的方法
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推噓1(1推 0噓 1→)留言2則,0人參與, 最新作者mimosasky (浪者天涯)時間17年前 (2008/10/04 23:30), 編輯資訊
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除了用細胞刮刀先將細胞刮下的方法外. 我們實驗室之前有用另一方法. 提出來大家一起討論看看. 先去除medium後以HBSS wash. 再以1X trypsin-EDTA (1mM)將細胞切下. 以HBSS (PBS也可以)沖洗下細胞. 放入1.5ml tube中離心. 去除上清液後改放入lysi

推噓0(0推 0噓 0→)留言0則,0人參與, 最新作者greenmoon00 (蒼天之月)時間17年前 (2008/10/04 19:59), 編輯資訊
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說我的方法. 10公分盤 medium吸掉 (如果有懸浮或需要用的死細胞就收到15ML TUBE). 1ML PBS(可冰可不冰) wash 吸至 15ML TUBE. 再加1ML PBS去刮 刮下來一樣收 TUBE. 最後用1ML PBS wash一下盤子 收至TUBE. 離心 1200rpm 5

推噓0(0推 0噓 0→)留言0則,0人參與, 最新作者amit (no)時間17年前 (2008/10/04 12:03), 編輯資訊
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想請問各位 如果要收很多的時間點. 就要先把細胞先收集起來. 我之前的方法是把盤子整個凍在-80. 但是拿出來加lysis buffer的時候 體積會多出一倍多. 所以參考了前面幾篇的方法 用PBS刮細胞再離心. 可是我用1500rpm 離心十分鐘後. 發現用tip吸supernatant 會有很多
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