Re: [討論] semi-dry transfer的條件應該怎麼抓？
買0.22吧？！這個不太會穿過去。
除非有特殊理由，不然好像大家都用這種。
可以用那種mutlicolor protein marker。
用這個觀察transfer的效果，
順便看看不同大小protein的效果。
因為不太會轉穿過去，用semidry比較擔心是轉久了乾掉，membrane會『燒到』。
之前一般的gel我們用0.8mA/cm2，轉兩個小時，
非常乾淨，但是很久。
或是1mA/cm2，一小時也差不多，
同事這個condition45分鐘，一般大小也都可以過去。
※ 引述《LIAR (墮天使)》之銘言：
: 由於我剛換新的system，包括buffer、膠的厚度、sample來源等等都和之前不一樣，
: 請問這種情況想抓條件，怎麼做比較好？
: 我目前覺得要處理兩種情況，一個是沒轉過去，一種則是轉過頭。
: 如果是轉不完全，可能會採用coomassie blue染轉完的膠，聽說coomassie blue靈
: 敏度夠高，沒染到應該就可以視同大部分都有轉出去了。
: 至於轉過頭嘛....目前我只有NC和.45 PVDF。
: 雖然我有看過「拿兩張PVDF，先.45再.22，之後染.22」來決定，不過只為了幾次
: 抓條件就買一大卷.22 PVDF有點浪費，而我也不曉得NC或是.45 PVDF本身疊兩層
: 有沒有同樣效果....
: 目前我只有想到這些方法，請問想找出最合適的條件，可以請大家給我一些指點嗎？
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過去的來不及追憶 現在的趕不及接受
得到的不懂得珍惜 失去的無法能忘記
這就是生活嗎？！
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◆ From: 61.230.12.252
推
07/19 23:17, , 1F
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