Re: [求救] touchdown pcr
※ 引述《threestars (等待)》之銘言：
: ※ 引述《bbiioo (梅子)》之銘言：
: : 想請問這個pcr
: : 是什麼情況下可以使用
: : 是 想要增加產物產量嗎?
: : 因為現在在進行的pcr
: : 還在試他的最佳的Tm
: : 老師是建議跑gradient
: : 我是想說利用這個方法找
: : 不知道可不可以
: : 我是要從chromosome DNA 找出目標基因來
: : 如果說用TOUCHDOWN這個方法
: : 是每一個cycle降0.5度吧?
: : 那範圍怎麼設呢??
: primer 黏合溫度一開始比Tm值 高15~18度 每cycle降1度
: 直到溫度到比Tm值低五到六度
因為黏合溫度有時不好找! 如果只要求有想要的東西
應該不是什麼增加專一性的方法
不過可以減少花費時間試 條件的時間
可以參考
Touchdown PCR to circumvent spurious priming during gene amplification.
Nucleic Acid Res.(1991) 19: 4008
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如果活在世上只是扮演著大家所期望的自己
那扮演好了又怎樣
不如靜靜的讓自己消失吧
總是多餘的存在只是種荒謬的錯誤
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 61.223.228.60
推
06/22 23:06, , 1F
06/22 23:06, 1F
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