有關his-tag純化

看板Biotech作者時間18年前 (2008/04/30 01:04), 編輯推噓0(000)
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想請問一下各位先進 在純化蛋白質中,我要純化his-tag的融合protein,使用的是Ni-NTA來純化, 想請教的部分就是: 1.為什麼buffer的ph值是保持在7.9呢? 2.binging buffer中有的會加入imidazole,這個物質不是只和histidine競爭Ni,為什麼 會用在binding buffer裡呢?(其實也想問一下binding buffer的功能是什麼) 3.elution buffer中有imidazole我能理解,可是washing buffer中為什麼也有呢? 實驗室使用的imidazole濃度分別為: 8X binging buffer:40mM imidazole 8X washing buffer:480mM imidazole 4X elute buffer:4M imidazole 求救一下了>"< -- 搬進我的小城市 維持治安 http://stevenua.myminicity.com/ http://stevenua.myminicity.com/sec 增進工廠 建馬路 http://stevenua.myminicity.com/ind http://stevenua.myminicity.com/tra 有空多幫點XD -- ※Post by STEVENUA from STEVENUA.Dorm8.NCTU.edu.
文章代碼(AID): #185rK200 (Biotech)
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