Re: [求救] flow的一些小撇步!!
※ 引述《ruthwu (Ruth)》之銘言：
: 欲用flow來看細胞的apoptosis
: 目前是用AnnexinV-PE & 7AAD進行雙染 (BD的apoptosis kit)
: 有些部分想請問一下:
: 1.收細胞前的wash,到底該用冰的PBS還是室溫的??
皆可
: 2.直接沖下??還是以EDTA沖下??
?
: 3.resuspend cells in 1x binding buffer(是冰的還是室溫呢??)
你應該是用kit, 4度C 比較適合 因為下一個步驟是........
: 在實驗中,control cell(without treatment)進行單染setting時
: 發現Annexin positive細胞佔了50-60%
: 同時7AAD positive細胞大約才20%
: 感覺是Annexin signal超強
染7-AAD 跟 Annexin V 的意義不同, 你了解之後就會發覺原因了
你的結果很正常 ^^
: (1*10^5 cells/100ul+3ul dye)
: 請教各位有經驗的大大,給予指點迷津吧!!
: 感激不盡!!
Good luck
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