[求救] flow的一些小撇步!!
欲用flow來看細胞的apoptosis
目前是用AnnexinV-PE & 7AAD進行雙染 (BD的apoptosis kit)
有些部分想請問一下:
1.收細胞前的wash,到底該用冰的PBS還是室溫的??
2.直接沖下??還是以EDTA沖下??
3.resuspend cells in 1x binding buffer(是冰的還是室溫呢??)
在實驗中,control cell(without treatment)進行單染setting時
發現Annexin positive細胞佔了50-60%
同時7AAD positive細胞大約才20%
感覺是Annexin signal超強
(1*10^5 cells/100ul+3ul dye)
請教各位有經驗的大大,給予指點迷津吧!!
感激不盡!!
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