[求救] PCR的問題
我的primer每條都是80b.p
只有每條的前面20b.p會去和template(plasmid)annealing
其餘的部分是用來做同源互換的
我用的酵素是pfu
但是我跑膠後怎樣都看不到我要的片段(約1900b.p)
template 1
10Xbuffer 2.5 94度 5分
2mMdNTP 2.5 94度 30秒]
primer-F 0.5 55度 30秒] 30cycle
primer-R 0.5 72度 2分 ]
pfu 0.3 72度 7分
d2H2O 17.7 4度 無限
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25ul
以上是我的條件,請問有哪邊可以改進的,謝謝^^
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 122.118.2.135
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