Re: [求救] real time PCR variation 很大(同sample)

看板Biotech作者 (Orz)時間16年前 (2008/03/25 22:58), 編輯推噓1(1推 0噓 1→)
留言2則, 2人參與, 最新討論串7/8 (看更多)
前面吃光光
→
03/25 01:17,
補一個 ABI機器似乎可以使用RNaseP進行校正
03/25 01:17
推
03/25 08:47,
因為是公用儀器，所以維修的是誰其實不清楚，只知道有人負
03/25 08:47
→
03/25 08:48,
責管理。
03/25 08:48
→
03/25 08:49,
我比較有興趣是Mix的問題，因為我們體積是10ul的，如果再
03/25 08:49
→
03/25 08:50,
mix很怕反而因為tip殘留變更不準，我們只有用96well離心機
03/25 08:50
→
03/25 08:51,
並沒有另外做mix的動作，想請問你們怎麼mix的 謝謝
03/25 08:51
推
03/25 19:03,
master mix泡好要spindown再分裝
03/25 19:03
簡略的敘述一下 我會先加水 然後混入F primer 然後 pipeting 數次 混入R primer 然後一樣 pipeting 數次 最後混mastermix 他比較濃稠 所以更要注意慢吸慢放 這樣就是我的mastermix製備 至於q大說得spindown.... 因為我都是貼著液面加 在加入前 也都會pipetin數次.... 所以我就省略了 然後進行分裝 orz～ 我是用384孔盤 5ul/reaction 檢體做triplicate 用到現在還ok 上機前會用離心機整盤spindown一下 但是沒有spindown的效果 跟有spindown 從實驗結果看不出差異 有整盤spindown一下 比較心安(?) tip有低殘的阿 可以多問問幾間 -- 修文 補了上機前spindown的部分 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ※ 編輯: huangsw 來自: 203.73.207.171 (03/25 23:01)
推
03/26 18:04, , 1F
因為我沒有每加一個就pipeting所以最後直接spindown!!
03/26 18:04, 1F
→
03/27 00:09, , 2F
XD 效果一樣就好
03/27 00:09, 2F
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