[求救] 有關大量表達蛋白的問題

看板Biotech作者 (酸糖果)時間18年前 (2008/02/25 22:46), 編輯推噓4(4推 0噓 2→)
留言6則, 5人參與, 最新討論串1/3 (看更多)
用E.coil來大量表達蛋白 經由超音波破菌 分離supernatant及pellet 而所表達的蛋白可能位在supernatant 或pellet 請問各位高手 假設蛋白表達在pellet，想要讓蛋白轉成表現在supernatant 有什麼方法或技巧？ ps：就我所知就是降低誘導的溫度，但是我試過30,28,16度 但還是沒有成功，不曉得還有什麼該注意的 或是其他小小技巧，請各位高手提供妙計 謝謝！ -- -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 122.127.67.200
推
02/25 22:48, , 1F
renature?
02/25 22:48, 1F
→
02/25 22:53, , 2F
renature？ 不好意思我不懂renature後就可以表達出來了？
02/25 22:53, 2F
推
02/25 22:58, , 3F
用urea溶 但protein會denature
02/25 22:58, 3F
推
02/26 02:24, , 4F
換一下表現系統，比如GST fusion的vector，
02/26 02:24, 4F
推
02/26 07:06, , 5F
換系統也不一定就會變在supernatanrXDDD
02/26 07:06, 5F
→
02/26 07:07, , 6F
讓他表現少一點..應該有機會..然後再用大量culture去純化
02/26 07:07, 6F
‣ 更多 artery 的文章
文章代碼(AID): #17mjJVn8 (Biotech)
‣ 更多 artery 的文章
文章代碼(AID): #17mjJVn8 (Biotech)