Re: [求救] 請問利用matrigel混合細胞打老鼠長腫瘤
※ 引述《mikis1107 (mikis1107)》之銘言：
: ※ 引述《humwang (gogowang)》之銘言：
: : matrigel的確在室溫溫會凝固
: : 我們實驗室的做法是
: : 先把matrigel從-20度放到4C回溫, overnight(讓它變成液態)
: : 在hood把cell trypsin下來, 加medium及trypsin inhibitor中和掉trypsin
: : count count cell number, 然後取需要的數量的細胞suspension離心
: : 然後用針筒(把針拔掉)mix 細胞跟matrigel(針筒要pre-cool)
: (1) 請問matrigel所用的含量是多少mg/ml呢?
: (2) 是分別取固定量的細胞液及matrigel,混合後再打老鼠?
我們是在將cell spin down後移掉上清液
然後直接用未稀釋的matrigel來re-suspend cell
Matrigel的濃度要看是哪一個batch
每個lot number的matrigel濃度不一定相同, 一般在10 mg/ml上下
: : 然後立即皮下注射到老鼠體內
: : 讓細胞跟chilled matrigel contact的時間盡量少
: (3) 請問是因為matrigel溫度較低會影響細胞的活性?
因為依照您的說法, 您所使用的細胞在低溫下存活率不高
所以減少細胞處在在低溫的時間應該會讓細胞有較佳的活性
或是說您也許試試看用不同數量的細胞來inject
做個dose response
說不定是因為您所用的細胞數量太少而導致細胞的活性不佳
: 還是怕它凝固??
: : 細胞就不容易死, 或是打nude mice說不定會更好
: 感謝您的回答~~幫助很大^^
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