Re: [求救] 請問利用matrigel混合細胞打老鼠長腫瘤
※ 引述《mikis1107 (mikis1107)》之銘言：
: 請問有人知道該怎麼操作嗎?
: 因為最近要試
: 但是實驗室沒人做過
: 自己也是第一次做有點無從下手@@
: 但老鼠已經有點超齡了所以可能要快點打
: 可以請有操作過的人
: 告訴我如何操作的細節嗎??
: 主要煩惱的是因為matrigel在室溫似乎會凝固
: 在低溫狀態才是液狀
: 但是我的細胞不能夠在低溫不然細胞會死亡
: 前一次打老鼠失敗可能是因為這樣子的緣故所以腫瘤長不出來
: 所以這次想要試試matrigel
: 感謝感謝
matrigel的確在室溫溫會凝固
我們實驗室的做法是
先把matrigel從-20度放到4C回溫, overnight(讓它變成液態)
在hood把cell trypsin下來, 加medium及trypsin inhibitor中和掉trypsin
count count cell number, 然後取需要的數量的細胞suspension離心
然後用針筒(把針拔掉)mix 細胞跟matrigel(針筒要pre-cool)
然後立即皮下注射到老鼠體內
讓細胞跟chilled matrigel contact的時間盡量少
細胞就不容易死, 或是打nude mice說不定會更好
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 158.130.148.50
推
01/22 11:31, , 1F
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