Re: [求救] 請問Anti-goat二抗的Blocking要用？
※ 引述《littlebu.bbs@ptt.cc (LittleBU)》之銘言：
> 一抗是Goat anti-mouse的抗體
> 二抗是Rabbit anti-goat IgG
> 現在的問題是在western的時候會有background
> membrane是用5%脫脂奶粉blocking 1hr
> 上網查到是說anti-goat IgG會跟bovine的IgG作用形成背景
> 所以脫脂奶粉或BSA皆不適合拿來Blocking
> http://www.listarfish.it/lsf/jackson/Jack_BAG_IgG.html
> 那請問各位還有什麼適合拿來Blocking
你自己給的網頁上不就有：
Blocking with 5% normal serum from the host species of the secondary antibody
以你的狀況來說 也就是 normal rabbit serum
> 另外我在做的是mouse tissue protein
> 有幾支一抗是mouse monoclone antibody
> 但是二抗的goat anti mouse會有non-specific binding
> 換過一家的二抗也一樣
> 請問有什麼方法可以將total protein內本來的mouse IgG去除掉？
用 mouse ab 抗 mouse protein 就有怪到了吧？
解決方法，用 protein A/G beads 來給你的 lysate 作 pre clean 吧
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故 勿推此文
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※ Origin: 生命科學 BBS <bbs.life.nthu.edu.tw>
◆ From: boblu.STUDENT.CWRU.Edu
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