[求救] 請問Anti-goat二抗的Blocking要用?

看板Biotech作者 (LittleBU)時間18年前 (2007/12/11 18:39), 編輯推噓1(104)
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一抗是Goat anti-mouse的抗體 二抗是Rabbit anti-goat IgG 現在的問題是在western的時候會有background membrane是用5%脫脂奶粉blocking 1hr 上網查到是說anti-goat IgG會跟bovine的IgG作用形成背景 所以脫脂奶粉或BSA皆不適合拿來Blocking http://www.listarfish.it/lsf/jackson/Jack_BAG_IgG.html 那請問各位還有什麼適合拿來Blocking 另外我在做的是mouse tissue protein 有幾支一抗是mouse monoclone antibody 但是二抗的goat anti mouse會有non-specific binding 換過一家的二抗也一樣 請問有什麼方法可以將total protein內本來的mouse IgG去除掉? 謝謝大家,請多指教 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.15.175.107

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我們lab.都用安佳脫脂奶粉
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blocking完用pbst rinse一下換個一次水就好 試試....
12/12 18:47, 2F

12/12 20:50, , 3F
我也是用安佳,blocking完還TBST洗了也一樣有背景
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所以才很頭痛,因為anti-mouse的二抗就不會有背景
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12/13 23:54, , 5F
1抗玩後 wash多換幾次buffer
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文章代碼(AID): #17NcZdo9 (Biotech)
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