[求救]請問一下double digstion的問題! Orz
各位大家好! 我有一個Vector和Insert DNA 都要用 XbaI 和 EcoRI 處理
但是NEB的Buffer推薦的是buffer 2，然後切出來後竟然會形成很多bands的情形出現!
但是後來我改用 EcoRI 的專用buffer切後一樣會切出很多條bands。
第一次酵素加 0.7μl 最後體積 50 μl處理3hr，
第二次酵素加 0.3μl 最後體積 20 μl處理overnight。
請問條件會有差嗎? (但是結果都切的亂七八糟!)
但是我之前以 EcoRI 和 XhoI 處理同樣的基因和vector切都沒問題耶~
(用的是EcoRI 的專用buffer)
謝謝各位了!
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