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討論串[求救]請問一下double digstion的問題! Orz
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#3
Re: [求救]請問一下double digstion的問題! Orz
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者sunorange (柳丁)時間18年前 (2007/10/25 18:40), 編輯資訊
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請參考一下 酵素附的 活性 每瓶都會和你說 是幾U的酵素. 要切多久 基本上和你加入的DNA 和酵素的活性有關. XhoI 和 EcoRI 要用 double digestion 的確是用. EcoRI buffer. XbaI 和 EcoRI 用buffer 2 + BSA 試試看 也可以直接用
#2
Re: [求救]請問一下double digstion的問題! Orz
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者Mouseking (叫我老鼠王....-_-)時間18年前 (2007/10/25 10:47), 編輯資訊
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你可以試試sequential切...先給XbaI, heat inactivation後再加入EcoRI. 如果還是不行..... 建議你換一管新的再試試.....XbaI,SpeI都是很難搞的restriction enzyme. 很多怪現象會出現尤其是作double digection....
#1
[求救]請問一下double digstion的問題! Orz
推噓5(5推 0噓 4→)留言9則，0人參與, 最新作者Nox4156 (人真好!)時間18年前 (2007/10/24 19:12), 編輯資訊
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各位大家好! 我有一個Vector和Insert DNA 都要用 XbaI 和 EcoRI 處理. 但是NEB的Buffer推薦的是buffer 2，然後切出來後竟然會形成很多bands的情形出現!. 但是後來我改用 EcoRI 的專用buffer切後一樣會切出很多條bands。. 第一次酵素加 0
(還有56個字)
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