Re: [問題] 關於 yeast two-hybrid vector
※ 引述《greenmoon00.bbs@ptt.cc (蒼天之月)》之銘言：
> 最近在接 yeast two-hybrid 用plasmid
> 用的vector是pGBKT7 7.3kb
> map:http://0rz.tw/9d2My
> 接一個1.2kb的insert 切位 pst1 bamH1
> PCR後單切 膠回收 再單切 再膠回收
> 接的時候先45度C Denature Vector insert
> 再跟據跑膠ban的亮度去決定比例
> total 20 ul
> 然後10~16度C 水浴 O/N
> 隔日transform到 DH5a 的E.coli中表現
> 講了這麼多....反正就是接不進去
> 學長說可能是因為vector很長所以兩端接不太到~~
> 有克服的方法嗎??
你這是cloning的技術問題
可能原因太多
回答不完
不過很少會碰到vector太長的問題
應該是其他問題
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※ Origin: 生命科學 BBS <bbs.life.nthu.edu.tw>
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